Elisa试剂盒详(xiang)细(xi)资(zi)料

中(zhong)文名称：APC,大鼠(shu)活化蛋白(bai)CELISA试(shi)剂(ji)盒价格(ge)

组(zu)织标(biao)本(ben)(ben)(ben)：切割标(biao)本(ben)(ben)(ben)后(hou)，称取重量。加(jia)入一(yi)定(ding)量的(de)(de)(de)PBS，PH7.4。用(yong)液氮(dan)迅速冷冻(dong)保(bao)存备(bei)用(yong)。标(biao)本(ben)(ben)(ben)融化后(hou)仍然保(bao)持2-8℃的(de)(de)(de)温度。加(jia)入一(yi)定(ding)量的(de)(de)(de)PBS(PH7.4)，用(yong)手(shou)工或匀(yun)浆器将(jiang)标(biao)本(ben)(ben)(ben)匀(yun)浆充分(fen)。离心(xin)20分(fen)钟左右(2000-3000转/分(fen))。仔细收集上清。分(fen)装后(hou)一(yi)份待检测(ce)，其(qi)余冷冻(dong)备(bei)用(yong)。标(biao)本(ben)(ben)(ben)采集后(hou)尽早(zao)进行(xing)提取，提取按(an)相关(guan)文献进行(xing)，提取后(hou)应尽快进行(xing)实验。

规    格：96T/48T

性(xing)    状：液体(ti)

保    存：2-8℃

有 效 期：6个月

实验原理(li)

用(yong)纯化(hua)的(de)(de)(de)(de)抗(kang)体包被(bei)微(wei)孔板，制成(cheng)固相载体，往包被(bei)抗(kang)该(gai)指(zhi)标(biao)抗(kang)体的(de)(de)(de)(de)微(wei)孔中(zhong)依次加入标(biao)本或(huo)标(biao)准品(pin)、生物(wu)素化(hua)的(de)(de)(de)(de)抗(kang)该(gai)指(zhi)标(biao)抗(kang)体、HRP标(biao)记(ji)的(de)(de)(de)(de)亲(qin)和素，经过(guo)*洗涤后用(yong)底物(wu)TMB显色(se)。TMB在过(guo)氧化(hua)物(wu)酶的(de)(de)(de)(de)催化(hua)下(xia)转化(hua)成(cheng)蓝色(se)，并在酸的(de)(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)下(xia)转化(hua)成(cheng)zui终的(de)(de)(de)(de)黄色(se)。颜(yan)色(se)的(de)(de)(de)(de)深浅和样品(pin)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)该(gai)指(zhi)标(biao)呈正相关。用(yong)酶标(biao)仪在450nm波长下(xia)测定(ding)吸光(guang)度(du)(du)(OD值(zhi))，计算(suan)样品(pin)浓度(du)(du)。

类型
　　ELISA可(ke)用于测定(ding)抗(kang)(kang)原(yuan)，也可(ke)用于测定(ding)抗(kang)(kang)体(ti)(ti)。在这种(zhong)测定(ding)方(fang)法中有(you)三个(ge)必要(yao)的(de)(de)试剂(ji)：（1）固相的(de)(de)抗(kang)(kang)菌素原(yuan)或抗(kang)(kang)体(ti)(ti)，即"免(mian)疫吸附(fu)剂(ji)"（immunosorbent）；（2）酶标(biao)记的(de)(de)抗(kang)(kang)原(yuan)或抗(kang)(kang)体(ti)(ti)，称(cheng)为"结(jie)合物"（conjugate）；（3）酶反应的(de)(de)底物。根据试剂(ji)的(de)(de)来(lai)源和标(biao)本的(de)(de)情况以及检(jian)测的(de)(de)具(ju)体(ti)(ti)条件，可(ke)设计出各种(zhong)不同类型的(de)(de)检(jian)测方(fang)法。用于临床检(jian)验的(de)(de)ELISA主要(yao)有(you)以下几种(zhong)类型：

              捕获包被法测抗体

     IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体的(de)(de)(de)检测(ce)(ce)用于传染病的(de)(de)(de)早期诊断(duan)中(zhong)。间(jian)(jian)接法(fa)ELISA一(yi)般(ban)仅适用于检测(ce)(ce)总(zong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体或(huo)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体。如(ru)用抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原包(bao)被的(de)(de)(de)间(jian)(jian)接法(fa)直接测(ce)(ce)定IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体，因标(biao)(biao)本(ben)中(zhong)一(yi)般(ban)同时存在(zai)较高浓度(du)的(de)(de)(de)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体，后(hou)者将(jiang)竞争(zheng)结合固相抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原而使一(yi)部份IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体不(bu)能结合到固相上。因此如(ru)用抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)人(ren)IgM作(zuo)为二抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)，间(jian)(jian)接测(ce)(ce)定IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体，必须(xu)先(xian)(xian)将(jiang)标(biao)(biao)本(ben)用A蛋(dan)白或(huo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体处理(li)，以(yi)除去(qu)IgG的(de)(de)(de)干扰。在(zai)临(lin)床(chuang)检验中(zhong)测(ce)(ce)定抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体IgM时多采用捕(bu)获(huo)包(bao)被法(fa)。先(xian)(xian)用抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)人(ren)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体包(bao)被固相，以(yi)捕(bu)获(huo)血清标(biao)(biao)本(ben)中(zhong)的(de)(de)(de)IgM（其(qi)中(zhong)包(bao)括(kuo)针(zhen)对抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原的(de)(de)(de)特(te)异性IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体和非特(te)异性的(de)(de)(de)IgM）。然后(hou)加入抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原，此抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原仅与(yu)特(te)异性IgM相结合。继而加酶标(biao)(biao)记针(zhen)对抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原的(de)(de)(de)特(te)异性抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体。再(zai)与(yu)底物作(zuo)用，呈(cheng)色(se)即(ji)与(yu)标(biao)(biao)本(ben)中(zhong)的(de)(de)(de)IgM成(cheng)正(zheng)相关(guan)。此法(fa)常用于病毒性感染的(de)(de)(de)早期诊断(duan)。甲型肝炎病毒（HAV）抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体的(de)(de)(de)检测(ce)(ce)模式(shi)见(jian)图。

　　类风湿因子(zi)（RF）同样能干扰捕(bu)获(huo)包被法测定IgM抗(kang)(kang)体(ti)，导致假阳(yang)性反应。因此中和IgG的间接法近来(lai)颇受青睐，用这类试剂(ji)检测抗(kang)(kang)CMV IgGM和抗(kang)(kang)弓形虫IgM抗(kang)(kang)体(ti)已获(huo)成功。

说明(ming)

1．检测原(yuan)理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法

2．试剂盒保存：-20℃(较长时(shi)间(jian)不用时(shi))；2-8℃(频繁使(shi)用时(shi))。

3．浓洗涤液低温保存会(hui)有盐析出，稀释时(shi)可在(zai)水浴中(zhong)加(jia)温助溶。

4．中、英文说(shuo)明(ming)书可能会(hui)有不*之处，请以英文说(shuo)明(ming)书为(wei)准。

5．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许(xu)水样物质，此(ci)为正常现象，不会对实(shi)验(yan)结果(guo)造成任何影响。