Elisa试剂盒详细资料(liao)

中文(wen)名(ming)称(cheng)：LH,BIM大鼠黄体素(su)ELISA试剂盒

组织(zhi)标(biao)(biao)(biao)本：切割标(biao)(biao)(biao)本后(hou)，称取(qu)(qu)重量(liang)。加入(ru)一定量(liang)的PBS，PH7.4。用(yong)液氮迅速(su)冷冻保(bao)存备用(yong)。标(biao)(biao)(biao)本融化后(hou)仍然(ran)保(bao)持2-8℃的温(wen)度。加入(ru)一定量(liang)的PBS(PH7.4)，用(yong)手(shou)工(gong)或匀浆(jiang)器将标(biao)(biao)(biao)本匀浆(jiang)充分(fen)。离心20分(fen)钟左(zuo)右(you)(2000-3000转/分(fen))。仔细收集上(shang)清。分(fen)装后(hou)一份待检测，其余冷冻备用(yong)。标(biao)(biao)(biao)本采集后(hou)尽早(zao)进(jin)行(xing)提(ti)取(qu)(qu)，提(ti)取(qu)(qu)按相关文献进(jin)行(xing)，提(ti)取(qu)(qu)后(hou)应尽快进(jin)行(xing)实验(yan)。

规    格：96T/48T

性(xing)    状：液(ye)体(ti)

保    存：2-8℃

有 效 期：6个月

实验原(yuan)理

用(yong)纯(chun)化的(de)(de)(de)抗体包被微孔(kong)板，制(zhi)成固相载体，往包被抗该指(zhi)标(biao)抗体的(de)(de)(de)微孔(kong)中(zhong)(zhong)依次(ci)加入标(biao)本或标(biao)准品(pin)、生物(wu)素化的(de)(de)(de)抗该指(zhi)标(biao)抗体、HRP标(biao)记(ji)的(de)(de)(de)亲和素，经过(guo)*洗涤(di)后(hou)用(yong)底(di)物(wu)TMB显(xian)色。TMB在(zai)过(guo)氧化物(wu)酶的(de)(de)(de)催化下(xia)转化成蓝色，并(bing)在(zai)酸(suan)的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)下(xia)转化成zui终的(de)(de)(de)黄色。颜色的(de)(de)(de)深浅和样品(pin)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)该指(zhi)标(biao)呈(cheng)正(zheng)相关。用(yong)酶标(biao)仪(yi)在(zai)450nm波(bo)长(zhang)下(xia)测定吸光度(OD值)，计算(suan)样品(pin)浓度。

类型
　　ELISA可用(yong)于(yu)测(ce)定抗原(yuan)，也可用(yong)于(yu)测(ce)定抗体(ti)。在这(zhei)种(zhong)测(ce)定方(fang)(fang)法中有(you)三个必要(yao)(yao)的(de)(de)(de)(de)试剂(ji)：（1）固相的(de)(de)(de)(de)抗菌素原(yuan)或(huo)(huo)抗体(ti)，即"免疫吸附(fu)剂(ji)"（immunosorbent）；（2）酶标记的(de)(de)(de)(de)抗原(yuan)或(huo)(huo)抗体(ti)，称为"结合物"（conjugate）；（3）酶反应的(de)(de)(de)(de)底物。根(gen)据试剂(ji)的(de)(de)(de)(de)来(lai)源和标本的(de)(de)(de)(de)情况以(yi)及(ji)检测(ce)的(de)(de)(de)(de)具体(ti)条件(jian)，可设计出各种(zhong)不同类(lei)型的(de)(de)(de)(de)检测(ce)方(fang)(fang)法。用(yong)于(yu)临床检验的(de)(de)(de)(de)ELISA主(zhu)要(yao)(yao)有(you)以(yi)下(xia)几种(zhong)类(lei)型：

              捕获包被法测抗体

     IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)(de)检(jian)测(ce)(ce)用(yong)(yong)于传染(ran)病的(de)(de)早(zao)期诊(zhen)断(duan)中。间接(jie)法(fa)ELISA一(yi)般仅(jin)适用(yong)(yong)于检(jian)测(ce)(ce)总抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)或IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)。如用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原包(bao)(bao)被的(de)(de)间接(jie)法(fa)直(zhi)接(jie)测(ce)(ce)定IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)，因(yin)(yin)标(biao)(biao)(biao)本(ben)中一(yi)般同时(shi)存在(zai)较高浓度的(de)(de)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)，后者将(jiang)(jiang)竞争结合(he)固(gu)(gu)相抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原而(er)使一(yi)部份IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)不能结合(he)到固(gu)(gu)相上。因(yin)(yin)此如用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)人IgM作(zuo)为(wei)二(er)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)，间接(jie)测(ce)(ce)定IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)，必须先将(jiang)(jiang)标(biao)(biao)(biao)本(ben)用(yong)(yong)A蛋白(bai)或抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)IgG抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)处理，以除(chu)去IgG的(de)(de)干扰。在(zai)临床检(jian)验中测(ce)(ce)定抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)IgM时(shi)多采用(yong)(yong)捕(bu)获(huo)包(bao)(bao)被法(fa)。先用(yong)(yong)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)人IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)包(bao)(bao)被固(gu)(gu)相，以捕(bu)获(huo)血清标(biao)(biao)(biao)本(ben)中的(de)(de)IgM（其(qi)中包(bao)(bao)括针对(dui)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原的(de)(de)特(te)(te)异(yi)性(xing)(xing)IgM抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)和(he)非特(te)(te)异(yi)性(xing)(xing)的(de)(de)IgM）。然后加入抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原，此抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原仅(jin)与特(te)(te)异(yi)性(xing)(xing)IgM相结合(he)。继而(er)加酶标(biao)(biao)(biao)记针对(dui)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原的(de)(de)特(te)(te)异(yi)性(xing)(xing)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)。再与底物(wu)作(zuo)用(yong)(yong)，呈色即与标(biao)(biao)(biao)本(ben)中的(de)(de)IgM成正相关(guan)。此法(fa)常用(yong)(yong)于病毒性(xing)(xing)感染(ran)的(de)(de)早(zao)期诊(zhen)断(duan)。甲型肝炎病毒（HAV）抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)体(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)(de)检(jian)测(ce)(ce)模式见(jian)图。

　　类(lei)风湿(shi)因子（RF）同(tong)样能(neng)干扰捕获包(bao)被(bei)法测(ce)(ce)定IgM抗(kang)体(ti)，导致假阳性(xing)反应。因此(ci)中和(he)IgG的间(jian)接法近来颇受(shou)青睐，用这类(lei)试剂(ji)检测(ce)(ce)抗(kang)CMV IgGM和(he)抗(kang)弓形虫IgM抗(kang)体(ti)已获成功。

说明

1．检测原(yuan)理(li)：采用双抗体夹心ABC-ELISA法

2．试(shi)剂盒保存：-20℃(较长时(shi)间不用时(shi))；2-8℃(频繁使(shi)用时(shi))。

3．浓洗涤液低(di)温保存(cun)会(hui)有盐析出，稀释(shi)时(shi)可在水(shui)浴中(zhong)加温助溶(rong)。

4．中、英(ying)文说(shuo)明书可(ke)能会有不*之处，请以英(ying)文说(shuo)明书为准。

5．刚(gang)开启的酶联板(ban)孔中可能会含(han)有少许(xu)水样物质，此为正常现(xian)象，不会对实验结果造成任何影响(xiang)。